Як розрахувати мертвий час у колонці рідинної хроматографії

Автор: Rachel Coleman
Дата Створення: 20 Січень 2021
Дата Оновлення: 23 Листопад 2024
Anonim
Як розрахувати мертвий час у колонці рідинної хроматографії - Наука
Як розрахувати мертвий час у колонці рідинної хроматографії - Наука

Зміст

Хроматографія широко використовується в хімічних лабораторіях для визначення ідентичності невідомого компонента. Цей компонент протікає крізь обгортковий матеріал колони і взаємодіє з частинками. Взаємодія між частинками та компонентами у зразку базується на привабливості або розчинності між ними. Молекули, які не взаємодіють з частинками матеріалу оболонки, можуть безперешкодно проходити через нього. Час, необхідний для проходження молекул від точки ін'єкції до системи на максимальному піку нереактивної молекули, - це мертвий час колони.

Крок 1

Зміцніть невідомий зразок невеликою кількістю сполуки, яка не утримується матеріалом колони. З'єднання буде проходити через колону без взаємодії з обгортковим матеріалом в колоні.


Крок 2

Завантажте у шприц приблизно 20 мікролітрів зразка та вставте голку шприца в ін'єкційний отвір. Завантажте петлю зразка з клапана, спорожнивши шприц у клапан.

Крок 3

Увімкніть прилад для хроматографії та запустіть мобільну фазу. Ця фаза протікає через прилад і відбирає зразок через колонку та детектор, який закінчується у ємності для відходів.

Крок 4

Активуйте клапан, який дозволяє зразку потрапляти на шлях потоку рідини. Це завантажує компоненти зразків у верхню частину колони і розподіл починається.

Крок 5

Відстежуйте сигнал випромінювача детектора та визначайте перший пік на хроматографі. Різниця між часом впорскування та максимумом першого піку, представленого армуючим компонентом, полягає в мертвому часі.

Крок 6

Виміряйте відстань між точкою впорскування та максимальною висотою першого піку. Помножте відстань на швидкість паперу або вісь, щоб знайти мертвий час.