Як зробити БДА (картопляний декстрозний агар) t

Автор: Carl Weaver
Дата Створення: 1 Лютий 2021
Дата Оновлення: 25 Листопад 2024
Anonim
Як зробити БДА (картопляний декстрозний агар)  t - Статті
Як зробити БДА (картопляний декстрозний агар) t - Статті

Зміст

Картопля з агарної декстрози (BDA) є хорошим напівтвердим середовищем загального призначення, що використовується для створення грибів. Він також часто використовується для ізоляції, вирощування та підтримки видів грибів у формуванні. Готові чашки Петрі або пробірки, що містять BDA, можна придбати, або BDA можна швидко виготовити, використовуючи комерційний премікс. Проте, складно зробити просту і ефективну версію з низькою вартістю.


Інструкції

Картопля (Zedcor Wholly Owned / PhotoObjects.net / Getty Images)

    Готують екстракт картоплі

  1. Покласти картоплю в каструлю з приблизно 1,2 л водопровідної води і гасити на плиті протягом години.

  2. Зняти каструлю з вогню і охолодити рідину, доки її неможливо зручно обробити (близько десяти хвилин).

  3. Залийте рідкий картопляний екстракт через фільтр або марлю і зберіть його в іншу ємність.

    Підготовка суміші

  1. Додають декстрозу і агар до літрової води екстракту картоплі.

  2. Досліджують рН розчину за допомогою паперу для тестування рН або рН-метр.

  3. Якщо рН вище 6,5, зменшують його, додаючи кожну краплю розчину хлористоводневої кислоти і роблять інший тест.

  4. Якщо рН менше 6, відрегулюйте його, додавши одну краплю розчину гідроксиду натрію одночасно і зробивши новий тест.


    Стерилізація

  1. Добре перемішати і розділити на менші партії по 250 мілілітрів. Налийте в чотири флакони об'ємом 500 мл (кожен флакон повинен бути наполовину заповнений, щоб не кип'ятити).

  2. Заряджайте кожен флакон шматочком вільно складеної алюмінієвої фольги, щоб плівка не впала, але також не робила повної герметизації.

  3. Покладіть банки в скороварку.

  4. Управляйте скороварку відповідно до інструкцій виробника для стерилізації BDA при 121 ° C при 15 psi протягом 15 хвилин.

  5. Вимкніть скороварку і поверніть її до атмосферного тиску, потім вийміть флакони і дайте їм охолонути, доки їх не можна буде обробити.

    Заливання суміші

  1. Вирівняйте чашки Петрі на рівній поверхні.

  2. Після охолодження флаконів до температури обробки, але перед тим, як середовище почне застигати, тримайте флакон однією рукою і зніміть кришку фольги іншою рукою.


  3. Для кожної чашки Петрі зніміть кришку однією рукою, швидко заповніть половину рідиною BDA і замініть кришку.

  4. Повторіть крок 3, доки всі чашки Петрі не будуть заповнені.

  5. Якщо BDA залишилося, вийміть пляшку з оригінальною кришкою фольги, дайте охолонути і затвердіть, затягніть алюмінієву кришку і зберігайте в холодильнику.

Як

  • Більшість грибів добре ростуть у слабокислих умовах, тому кінцеве значення рН має бути між 6 і 6,5, хоча його можна регулювати до будь-якого рН, необхідного для конкретного виду.
  • Нехай кришки чашок Петрі відкриються достатньо, щоб дозволити суміші налити і накритися якомога швидше.
  • Для отримання швидкості та ефективності розливу агару в чашках Петрі потрібна практика.
  • Після охолодження і затвердіння посуд BDA можна загорнути в пластик і зберігати в холодильнику місяцями.
  • Більшість водопровідної води містить мінерали, корисні для росту грибів, однак, якщо місцева вода має екстремальні мінеральні концентрації або дуже високий або низький рН, замінити її дистильованою водою.

Повідомлення

  • Дотримуйтеся всіх інструкцій з експлуатації та безпеки для скороварки, що буде використовуватися.
  • Залиште ковпачки пляшки вільно при стерилізації скороварки, щоб уникнути надмірного тиску.
  • Використовуйте жаростійкі рукавички при роботі з гарячими контейнерами.
  • Одягайте захисні окуляри при роботі скороварки під час видалення стерильного БДА і під час заливання.

Що вам потрібно

  • 300 г картоплі очищують і розрізають
  • Пан
  • Кухонний фільтр
  • PH тестер або pH метр
  • 1 молярну соляну кислоту
  • 1 молярний гідроксид натрію
  • 4 скляні флакони Ehrlenmayer розміром 500 мл (або інші контейнери з вузьким ротом, які можна автоклавувати)
  • 10 г декстрози (глюкози) порошку
  • 20 г агару
  • Алюмінієва фольга
  • Плита під тиском
  • Стерильні чашки Петрі